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TRIZOL

简要描述:EX1880 TRIZOL 国产
规格:100ml/500ml 保存:4℃避光保存,保质期 12 个月。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-10-09
  • 访  问  量:311
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EX1880 TRIZOL 国产

规格:100ml/500ml 保存:4℃避光保存,保质期 12 个月。

EX1880 TRIZOL 国产

产品简介: 
本试剂是一种通用的总RNA提取试剂,适用于动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提,可有效防止RNA在提取过程中的降解。获得的RNA可直接用于Northern杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase保护实验,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。该试剂可用于100次总RNA提取(10平方厘米细胞或100mg组织)。
操作说明: 
自备新开封或专用氯仿,异丙醇,75%乙醇,DEPC处理水。 
1. 细胞裂解或组织匀浆: 
1)贴壁细胞:吸尽培养液,每10平方厘米(6孔板孔或35 mm平皿)细胞加入1 ml TriQuick Reagent,使其覆盖培养细胞,再用吸管或加样器吹打2~3次,细胞应全裂解,然后转移至离心管中。 
2)悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,每五百万至一千万(5×106-1×107)动植物或酵母细胞,或一千万 (1×107)细菌,加入1ml TriQuick Reagent 。用吸管或加样器吹打,使其全裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分,可用匀浆器匀浆,以确保其全裂解。转移至离心管中。 
3)组织:先将组织剪切成小块,放入玻璃匀浆器内。冷冻组织可在研钵中研磨匀浆。每50-100mg组织加入1ml TriQuick Reagent ,匀浆至全裂解。转移至离心管中。 
裂解产物应呈澄清的透明粘稠液体。室温放置5分钟。对于多糖、蛋白等杂质丰富的组织样品,匀浆后仍会存留有不溶物质,可12000g 4℃离心10分钟,然后吸取上清至一新的离心管中。 
2. 分离:在装有裂解物的离心管中加入0.2倍体积的氯仿(1 ml TriQuick Reagent 加入0.2 ml氯仿),振荡器上充分振荡混匀30秒,室温放置2-3分钟。12000g 4℃离心10分钟,然后吸取含总RNA的上层水相至一新的离心管中,每毫升TriQuick Reagent 约可吸取0.5-0.6 ml。有机相和中间层含有DNA和蛋白质,应避免触及。 
3. 沉淀:按每毫升TriQuick Reagent 加入0.5 ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀10分钟。12000g 4℃离心10分钟,在管底可见RNA沉淀。弃上清,按每毫升TriQuick Reagent 加入1 ml 75%乙醇,轻轻颠倒混匀,以清洗RNA沉淀。12000g 4℃离心2分钟,弃去液体,小心勿丢弃RNA沉淀。室温倒置晾干5~10分钟。 
4. 溶解:加入适量DEPC处理水使RNA沉淀溶解。存放于-80℃。
注意事项:
1,RNA提取过程中所用器皿、离心管、吸头等应保证无污染无RNA酶。操作中应小心,防止外源性RNA酶污染样品导致RNA样品降解。 2,试剂中含有酚等有害物质,注意个人防护。

EX1880 TRIZOL 国产

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