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小鼠外周血血小板分离液试剂盒

简要描述:CB7901-200mL/KIT 小鼠外周血血小板分离液试剂盒
规格:3×200 mL/kit
保存条件:本产品对光敏感,应该室温避光储存,保质期2年。无菌开封后,保存于室温。

  • 产品型号:CB7901
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-08-22
  • 访  问  量:353
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CB7901-200mL/KIT 小鼠外周血血小板分离液试剂盒

规格:3×200 mL/kit
保存条件:本产品对光敏感,应该室温避光储存,保质期2年。无菌开封后,保存于室温。

CB7901-200mL/KIT 小鼠外周血血小板分离液试剂盒

操作步骤: 

1. 取新鲜抗凝全血(EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝均可)或者去纤维蛋白血液,用等体积的全血及组织稀释液或者PBS稀释全血。

2. 在离心管中加入至少5mL的分离液(当血液的体积大于等于3mL,加入2倍体积分离液,但二者的总体积不能超过离心管的三分之二,否则会影响分离效果)。

3. 将稀释后的血液平铺到分离液液面上方,注意保持两液面界面清晰(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后将血液小心的平铺于分离液上,因为两者的密度差异,将形成明显的分层界面。如果样品较多,加样的时间较长,在离心之前出现红细胞成团下沉属正常现象)。

4. 室温,水平转子200-250g ,离心15min(血液的体积越大所需的离心力越大,离心时间越长,最佳的分离条件需摸索)。

5. 离心后,此时离心管中由上至下分为四层:最上层为富含血小板的血浆层;第三层为分离液层;分离液与血浆层之间是白色细胞层;第四层为红细胞层。

6. 小心的吸取富含血小板的血浆层到15mL洁净的离心管中,加入10mLPBS或细胞洗涤液(如果需要得到富含血小板的血浆,可直接吸取,不再清洗)。500g,离心20min

7. 弃上清,5mLPBS或细胞洗涤液重悬血小板,500g,离心20min

8. 弃上清,重悬备用。

注意事项:

A. 开封前颠倒混匀,本分离液为无菌产品,为延长分离液保存时间,请在无菌条件下启封,避免微生物污染。

B. 分离液使用时应始终保持室温(18~25℃),如室内温度较低,可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条件下离心,分离效果差。

C. 吸取过多的血小板血浆层下层溶液会导致交界处白细胞混杂。

D. 血液样本最好为新鲜抗凝血(采血2 h以内),避免冷冻和冷藏。

E. 稀释血液或洗涤细胞,不可使用含CaMg离子的缓冲液及培养液,降低细胞得率及纯度。

F. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其带有的静电作用,可能会导致细胞挂壁,影响分离效果。

G. 血液样本的粘稠度或者是温度差异,可能会影响分离效果,可以对血液稀释或者是调节离心转数和离心时间,摸索最佳的分离条件。

H. 不同动物血液在不同比重分离液中的细胞离散系数及细胞带电不同,用户在制定分离液时应提供所需分离液的比重、动物种属及被分离细胞的名称。

CB7901-200mL/KIT 小鼠外周血血小板分离液试剂盒

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