您现在的位置:首页 > 产品展示 > 细胞生物学 > 细胞分离 > CB6320小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒

小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒

简要描述:CB6320 200KIT 小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒
规格:3 ×200 mL/kit
保存:室温避光储存,有效期至少2年。启封后置4℃保存,有效期一周。

  • 产品型号:CB6320
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-08-22
  • 访  问  量:213
品牌其他品牌供货周期现货

CB6320 200KIT 小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒

规格:3 ×200 mL/kit
保存:室温避光储存,有效期至少2年。启封后置4℃保存,有效期一周。

CB6320 200KIT 小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒

试剂盒内容

各种动物脏器组织淋巴细胞分离液     200mL

全血及组织稀释液                    200mL

细胞洗涤液                     200mL

淋巴细胞分离方法

1. 制备脏器组织的单细胞悬液。

2. 取一支适当的离心管,加入与脏器组织单细胞悬液等量的分离液(分离液最少不得少于3 mL,总体积不能超

过离心管的三分之二,否则会影响分离效果)。

3. 小心吸取单细胞悬液加于分离液液面上,注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取单细胞悬液,然后小心的平铺于分离液上,因为两者的密度差异,将形成明显的分层界面。)

4. 室温,500~900g,离心20~30min。(根据脏器组织单细胞悬液的量确定离心条件,单细胞悬液量越大,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件可以自行摸索,以达到最佳分离效果)。

5. 离心后,此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层为稀释液层;第二层为环状乳白色淋巴细胞层;第三层为透明分离液层;第四层为红细胞层。

6. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层至另一洁净的15mL离心管中,向离心管中加入10ml细胞洗涤液洗涤白膜层细胞,250g,离心10min

7. 弃上清,5mLPBS或细胞清洗液重悬细胞,250g,离心10min

8. 重复步骤7

9. 弃上清,细胞重悬备用。

脏器组织单细胞悬液的制备方法

脏器组织研磨的方法:

1. 无菌条件下摘取脏器组织,撕去被膜,用眼科剪将脏器组织剪成小块。

2. 将尼龙筛网或者是细胞过滤筛放置于平皿上,加入少量全血及组织稀释液(保证脏器组织及获得的细胞处于液体环境中)。

3. 将脏器组织放置于筛网上,使用注射器活塞或者是无菌镊子来研磨脏器组织(尽量控制研磨力度,保持筛网悬空,避免在皿底上直接研磨而造成大批细胞死亡)

4. 研磨后使用全血及组织稀释液冲洗筛网,收集细胞悬液,再经滤网过滤。

注:

A. 可用酶消化法,使用胶原酶对脏器组织组织进行消化,得到单细胞悬液。

B. 如果最终得到的细胞需要培养,那全过程所需试剂与器材均要求无菌。

C. 根据脏器组织的体积控制单细胞悬液的浓度在108~109/mL

注意事项:

A. 开封前颠倒混匀,本分离液为无菌产品,为延长分离液保存时间,请在无菌条件下启封,避免微生物污染。

B. 分离液使用时应始终保持室温(18~25℃),如室内温度较低,可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条件下离心,可能会导致白膜层中红细胞污染加重。

C. 待分离的组织要求新鲜,避免冷冻和冷藏。

D. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其带有的静电作用,可能会导致细胞挂壁影响分离效果。

E. 如果要进一步对分离的细胞进行培养,那在制备单细胞悬液和分离过程中,注意无菌操作,避免微生物污染。

CB6320 200KIT 小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
相关文章